تأثیر بیان پایدار igg۴ نوترکیب بر رشد سلولهای sp۲.۰
نویسندگان
چکیده
هدف: مطالعه تغییرات فیزیولوژیک سلولهای نوترکیب در مقایسه با سلولهای والد، اطلاعات مفیدی برای بهبود کارآیی فرایند تولید فراهم مینماید. در این مطالعه تأثیر بیان igg4 کایمریک علیه نشانگر cd33 بر رشد سلول sp2.0 بررسی شده است. مواد و روش‌ها: ژنهای نواحی متغیر زنجیرههای سبک و سنگین آنتیبادی تولید شده توسط سلول m195 به ترتیب در ناقلهای pfuse-clig-hk و pfuse-chig-hg4 همسانهسازی شد. پلاسمیدهای نوترکیب در دو مرحله با استفاده از لیپوفکتامین به سلولهای sp2.0 منتقل شد. سلولهای پایدار در محیط حاوی آنتیبیوتیکهای بلاستیسیدین و زئوسین انتخاب شدند. الحاق سازه نوترکیب به ژنوم سلولهای تراریخت مقاوم به آنتیبیوتیکها و همچنین بیان igg4 با استفاده از روشهای pcr، rt-pcr و وسترن بلات بررسی شد. برای مطالعه پارامترهای کینتیکی، سلولهای والد و نوترکیب با چگالی 105×1 سلول در هر میلیلیتر محیط کشت در پلیت 12 خانه به مدت 9 روز انکوبه شدند و هر 24 ساعت از سلولها نمونهبرداری شد و شمارش تعداد سلول زنده و محاسبه درصد زنده بودن انجام گرفت. نتایج: بر اساس نتایج pcr، rt-pcr و وسترن بلات، ایجاد سلول تولید کننده پایدار igg4 تأیید شد. این مطالعه نشان داد که حداکثر چگالی سلولی برای سلولهای نوترکیب در مقایسه با سلولهای والد 46 درصد کاهش یافته است در حالی که در این نمونهها درصد سلولهای زنده تغییری نکرده است. نتیجهگیری: بر اساس نتایج این تحقیق بیان igg4 کایمریک در سیستم sp2.0/pfuse-chig-hg4-pfuse-clig-hk باعث تغییر برخی از پارامترهای رشدی سلول میزبان میشود.
منابع مشابه
بررسی چرخه سلولی، بیان ژنهای میوژنیک و کنترل کننده رشد سلولهای میوبلاست جنینی گوسفند با ازدیاد بیان ژن فولیستاتین
هدف: هدف از این مطالعه بررسی اثرات ازدیاد بیان ژن فولیستاتین بر چرخة سلولی، بیان ژنهای میوژنیک و فاکتور رشد سلولهای میوبلاست جنینی گوسفند در محیط آزمایشگاه بود که با استفاده از ویروس AAV سروتیپ 2 حمل‌کنندة فولستاتین انجام شد.مواد و روش‌ها: سلولهای میوبلاست جنینی بهدست آمده از جنین های 60 روزه گوسفند در محیط رشد و تمایز، کشت داده شدند. میزان جذب نوری د...
متن کاملبیان، تخلیص و بررسی عملکرد ناحیه کینازی گیرنده نوترکیب عامل رشد فیبروبلاستی 2bانسانی
زمینه: گیرنده عامل رشد فیبروبلاستی 2b ( FGFR2b ) در مسیر پیامرسانی سلولی و تنظیم فرایندهای مهم زیستی از جمله تمایز و تکثیر سلولی نقش اساسی دارد. تغییرات ژنتیکی نظیر جهش نقطهای در ناحیه تیروزین کینازی FGFR2b با سرطان پستان، تخمدان و رحم در ارتباط است. هدف: مطالعه به منظور بیان و خالصسازی مقدار مناسبی از ناحیه کینازی FGFR2b انسانی انجام شد. مواد و روش‌ها: این مطالعه تجربی در سال 1392 در...
متن کاملکلون و بیان ژن نوترکیب هومون رشد با استفاده از برچسب تیوردوکسین
هدف: در قرن حاضر، تولید داروهای نوترکیب افزایش یافته است. از جمله این داروها، هورمون رشد میباشد که بهعلت مشکلاتی که در پروسهی بیان نوع سیتوپلاسمی و پری پلاسمی این پروتئین وجود دارد، یافتن راه حلی که بتواند بیان را بهینه نماید ضروری بهنظر میرسد. لذا در این تحقیق با استفاده نمودن از trx-tag بیان هورمون رشد را بهصورت محلول بهینه شد که علاوه بر افزایش بیان پرتئین (حل مشکل پری...
متن کاملبیان نوترکیب فاکتور رشد اپیدرم انسانی در باکتری E. coli و ارزیابی اثر آن بر دودمان سلولی NIH-3T3
خانواده EGF شامل 13 عضو می باشد و فاکتور رشد اپیدرم انسانی یکی از اعضای این خانواده شناخته شده که در ترمیم زخم های اپیدرم پوستی ایفای نقش می کند. این فاکتور، یک پلی پپتید اساسی برای ترمیم زخم و آغاز تقسیم میتوزی است. در این مطالعه، ژن فاکتور رشد اپیدرم انسانی از بانک ژنی استخراج و پس از بهینه سازی کدون‌های آن براساس ترجیح کدونی باکتریE. coli در وکتور pET21a(+) سنتز گردید. وکتور حامل ژن مذکور به...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۶، شماره ۴، صفحات ۲۷-۳۷
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023